Intranet Areál web

Pokroky ve fázově-kontrastní mikroskopii (Neuromethods 2018)


Difrakční jevy zodpovědné za tvorbu obrazu v mikroskopu využíváme ke zvýšení účinnosti fázově-kontrastní mikroskopie.

Difraktogramy vysoce periodických objektů (B) jsou zřetelně patrné v zadní ohniskové rovině objektivu (výřezy v A a B).

A. Bez difraktujících objektů v zorném poli je viditelná pouze kondensorová (osvětlovací) clona.

B. Periodicky uspořádaná žebra tělních šupin rybénky cukrové (Lepisma saccharina). V závislosti na jejich hustotě (prostorové frekvenci) a orientaci je centrální světlý prstenec (obraz kondensorové clony) rozštěpen do několika excentricky umístěných prstenců.

C. Živé neobarvené epiteliální buňky z ústní sliznice autora (RP). Apodizovaná fázově-kontrastní mikroskopie (kterou vynalezl Tatsuro Otaki 1999) zmírňuje ‘halo‘ artefakty, ale u opticky tenkých buněk také snižuje obrazový kontrast.

Popisujeme i další technická řešení (modifikace optické sestavy) vhodná pro různé typy buněk.

Upraveno podle:

Pelc R., Hostounský Z., Otaki T. & Katoh K. (2018 v tisku) Conventional, apodized and relief phase-contrast microscopy. In: Neurohistology & Imaging: Basic Techniques (Pelc R., Doucette J.R. & Walz W., Eds.), pp. XXX-XXX. Springer (Humana Press), New York (the NEUROMETHODS series, vol. XX)